IMDM (Medium Dulbecco Diubah Suai Iscove)

Medium kultur IMDM yang ditambah dengan selenium, HEPES, natrium piruvat dan asid amino dan vitamin tambahan berdasarkan medium DMEM sangat kaya dengan nutrien dan sangat sesuai untuk pembiakan pesat, kultur sel berketumpatan tinggi. Media IMDM bukan sahaja boleh mengembangkan sel dengan keperluan khasiat khas (cth, limfosit B tikus, sel B yang dirangsang LPS, sel hematopoietik sumsum tulang, limfosit T, dan pelbagai sel hibridoma), tetapi juga berfungsi sebagai cecair asas untuk beberapa serum unik. media percuma.

Ramuan Medium Budaya IMDM

L-glutamin (Glutamine)

L-glutamin (Glutamine) ialah unsur nutrien penting dalam kultur sel, tetapi ia tidak stabil dalam larutan dan akan merosot secara spontan. Jumlah L-glutamin boleh sewenang-wenangnya diselaraskan mengikut keperluan penyelidikan medium tanpa L-glutamin, dan penambahan L-glutamin segar atau penggantinya pada masa penggunaan adalah lebih bermanfaat kepada pertumbuhan sel.

L-alanyl-L-glutamin (Ala-Glu), juga dikenali sebagai alanyl-glutamin dan alanyl-glutamyl dipeptide, ialah aditif kultur sel termaju yang boleh menggantikan secara langsung L-glutamin dalam medium kultur sel. l-Glutamine ialah nutrien penting dalam kultur sel, tetapi ia tidak stabil dalam larutan dan akan, walau bagaimanapun, ia tidak stabil dalam larutan dan secara spontan merosot untuk menghasilkan ammonia dan asid piroglutamat, yang mana ammonia berbahaya kepada sel, manakala L-alanyl- L-glutamin sangat stabil dalam larutan akueus dan tidak merosot secara spontan. Mekanisme penggunaan selular ialah semasa kultur sel, sel akan secara beransur-ansur melepaskan peptidase ke dalam medium kultur untuk menghidrolisis L-alanil-L-glutamyl menjadi L-alanine dan L-glutamin, dan kemudian sel akan mengambil dan menggunakan kedua-dua hidrolisis ini. produk. Proses penggunaan selular L-alanyl-L-glutamyl adalah serupa dengan strategi kultur penambahan aliran, di mana tahap L-glutamin yang rendah ditambah secara berterusan ke dalam medium kultur, dengan itu meningkatkan penggunaan L-glutamin tanpa menghasilkan lebihan. ammonia, yang lebih kondusif untuk pertumbuhan sel. L-alanyl-L-glutamyl boleh menggantikan L-glutamin equimolar, sesuai untuk semua sel, memerlukan sedikit penyesuaian, dan boleh memanjangkan masa kultur sel. Ia juga boleh memanjangkan masa kultur sel dan mengurangkan bilangan laluan, yang menjimatkan masa dan wang. Sel yang dikultur dalam medium yang ditambah dengan L-glutamin menunjukkan pengurangan aktiviti yang lebih perlahan daripada yang dikultur dalam medium yang ditambah dengan L-glutamin. Tempoh kelewatan yang lebih lama adalah disebabkan oleh masa yang diperlukan untuk pembebasan peptidase dan pencernaan dipeptida.

HEPES

HEPES ialah penimbal biologi yang sangat baik, yang tidak mempunyai kesan toksik pada sel. Medium dengan HEPES boleh mengekalkan julat pH yang malar untuk jangka masa yang lebih lama, yang boleh menghalang pertumbuhan sel secara berkesan daripada terjejas teruk oleh turun naik pH medium kultur yang besar. Ia boleh digunakan dalam inkubator bebas CO2.

Penyelesaian Penisilin-streptomisin

Larutan penisilin-streptomisin, juga biasanya dirujuk sebagai "antibiotik berganda", adalah antibiotik yang paling biasa digunakan dalam kultur in vitro untuk mencegah pencemaran mikrob, di mana penisilin mengganggu sintesis dinding sel bakteria dan amat berkesan terhadap bakteria Gram-positif, manakala streptomycin menghalang sintesis protein bakteria dengan mengikat subunit 30S ribosom bakteria dan amat berkesan terhadap Streptomycin yang mengikat subunit 30S ribosom bakteria dan menghalang sintesis protein bakteria, yang berkesan terhadap kedua-dua bakteria Gram-negatif dan Gram-positif, tetapi amat berkesan terhadap bakteria Gram-negatif. Gabungan penisilin dan streptomisin boleh menghalang kebanyakan pencemaran bakteria.

Produk ini mengandungi asid amino, vitamin, garam tak organik dan banyak komponen lain yang diperlukan untuk pelbagai kultur sel, tetapi tidak mengandungi protein, lipid atau sebarang faktor pertumbuhan, jadi produk harus digunakan dengan serum atau bahan tambahan tanpa serum.

Awas Medium Budaya IMDM

• Produk ini telah ditapis dan dinyahbakteria dan harus digunakan dengan berhati-hati untuk operasi aseptik untuk mengelakkan pencemaran.
• Jangan beku-cairkan produk untuk mengekalkan penggunaan terbaik produk.
• Produk ini bertujuan untuk penyelidikan saintifik atau penggunaan kajian lanjut sahaja, bukan untuk diagnosis atau rawatan.