Serbuk M199 Sederhana

M199 amat sesuai untuk kultur sel tidak berubah dan juga biasa digunakan dalam virologi, pengeluaran vaksin, dan kultur in vitro bagi eksplan utama sel epitelium pankreas tikus dan tisu kanta tetikus. Berbanding dengan media basal lain, M199 mengandungi komponen unik, termasuk adenine, adenosine, hypoxanthine, thymine, dan vitamin lain. M199 mempunyai dua komposisi garam seimbang, komposisi garam Earle biasanya digunakan dalam persekitaran CO2, komposisi garam Hank digunakan dalam persekitaran bukan CO2 medium tidak mengandungi protein, lipid atau faktor pertumbuhan. Sederhana 199 menggunakan sistem penimbal natrium bikarbonat (199 g/L) dan oleh itu memerlukan persekitaran CO2.2 5–10% untuk mengekalkan pH fisiologi. Untuk pelbagai aplikasi kultur sel, kami menyediakan media M2 yang diubah suai dengan pelbagai komponen, serta media M199 dengan komponen yang boleh disesuaikan.

Bahan-bahan Serbuk Sederhana M199

Medium kultur sel serbuk kering M199 ini perlu ditambah dengan natrium bikarbonat, diselaraskan untuk pH dan ditapis semasa penyediaan. Skim penyediaan terperinci adalah seperti berikut:

1. Tambah 950 mL air suling ke dalam bekas pembancuh sehampir mungkin dengan isipadu akhir.
2. Tambah air sederhana kering pada suhu bilik (15°C hingga 30°C) dan kacau perlahan-lahan. Jangan panaskan air.
3. Bilas bahagian dalam pek untuk mengeluarkan sisa serbuk.
4. Tambah 29.3 mL larutan 75 g/L NaHCO3 ke dalam medium.
5. Laraskan pH kepada 0.2 hingga 0.3 unit di bawah pH kerja akhir yang dikehendaki dengan menambah dan mengacau 1 N NaOH atau 1 N HCl secara perlahan-lahan. pH mungkin meningkat sebanyak 0.1 hingga 0.3 unit selepas penapisan. pH kerja yang disyorkan ialah 7.1-7.4.
6. Laraskan isipadu akhir dengan air suling.
7. Segera proses medium melalui fungsi penapisan membran penapis 0.2 μm ke dalam bekas steril menggunakan sistem tekanan positif.