Medium Penting Minimum Serbuk (MEM)

RPMI-1640 ialah medium 5A McCoy yang dipertingkatkan, dan Ia mempunyai kesan unik berbanding media lain kerana ia mengandungi glutation agen pengurangan dan kepekatan vitamin yang tinggi. RPMI 1640 mengandungi biotin, vitamin B12, dan PABA, yang tidak terdapat dalam MEM dan DMEM Eagle. Selain itu, medium mengandungi kepekatan vitamin inositol dan kolin yang sangat tinggi. Medium RPMI 1640 didapati sesuai untuk pelbagai sel mamalia termasuk sel HeLa, sel jurkat, sel MCF-7, sel PC12, sel PBMC, astrosit dan sel kanser, ia adalah salah satu media yang paling banyak digunakan.RPMI 1640 medium tidak mengandungi protein, lipid atau faktor pertumbuhan. Jadi ia biasanya memerlukan 10% serum lembu janin (FBS) sebagai tambahan.RPMI 1640 menggunakan sistem penimbal natrium bikarbonat (2.0 g/L) dan oleh itu memerlukan persekitaran 5-10% CO2 untuk mengekalkan pH fisiologi. Untuk pelbagai aplikasi kultur sel, kami menawarkan RPMI 1640 Modified Medium dengan pelbagai komponen dan RPMI 1640 Medium dengan komponen yang boleh disesuaikan.

Bahan-bahan Serbuk RPMI-1640 Sederhana

Medium serbuk kering RPMI-1640 ini perlu ditambah dengan natrium bikarbonat, pH diselaraskan dan ditapis semasa menyediakan. Kaedah perumusan terperinci adalah seperti berikut:

1. Tambah 950 mL air suling ke dalam bekas pembancuh sehampir mungkin dengan isipadu akhir.
2. Tambah air sederhana kering pada suhu bilik (15°C hingga 30°C) dan kacau perlahan-lahan. Jangan panaskan air.
3. Bilas bahagian dalam pek untuk mengeluarkan sisa serbuk.
4. Tambah 29.3 mL larutan 75 g/L NaHCO3 ke dalam medium.
5. Laraskan pH kepada 0.2 hingga 0.3 unit di bawah pH kerja akhir yang dikehendaki dengan menambah dan mengacau 1 N NaOH atau 1 N HCl secara perlahan-lahan. pH mungkin meningkat sebanyak 0.1 hingga 0.3 unit selepas penapisan. pH kerja yang disyorkan ialah 7.1-7.4.
6. Laraskan isipadu akhir dengan air suling.
7. Segera proses medium melalui fungsi penapisan membran penapis 0.2 μm ke dalam bekas steril menggunakan sistem tekanan positif.