Cara Mencegah Pencemaran Aerosol di Makmal PCR

Aplikasi dan pembangunan teknologi PCR (tindak balas rantai polimerase) telah membawa kepada bukti yang lebih berkesan untuk diagnosis penyakit, terutamanya promosi dan penggunaan PCR kuantitatif pendarfluor, yang telah meningkatkan sensitiviti dan ketepatan ujian dengan banyak. Walau bagaimanapun, dengan penggunaan meluas teknologi ini dalam makmal pengesanan patogen, masalah pencemaran aerosol di makmal PCR secara beransur-ansur menimbulkan kebimbangan. Untuk mengelakkan pencemaran aerosol DNA / RNA makmal PCR dengan berkesan, untuk mendapatkan keputusan ujian yang stabil dan boleh dipercayai, untuk mengelakkan positif palsu, makmal PCR untuk mewujudkan langkah-langkah anti-pencemaran yang ketat dan sistem pemantauan pencemaran yang sepadan untuk mengelakkan pencemaran pencemaran aerosol, setelah menemui aerosol pencemaran, untuk segera mencari punca dan penyelesaian yang sepadan kepada masalah pencemaran.

Pengezonan Makmal

Makmal PCR hendaklah dibahagikan kepada empat bahagian mengikut peraturan yang berkaitan: bahagian penyediaan reagen, bahagian penyediaan spesimen, bahagian amplifikasi PCR, dan bahagian analisis produk, dengan dua bahagian pertama ialah bahagian pra-amplifikasi dan dua bahagian terakhir ialah bahagian bahagian selepas amplifikasi. Kawasan pra-amplifikasi dan kawasan pasca-amplifikasi hendaklah dipisahkan dengan ketat dan dilengkapi dengan pengudaraan dan penulenan untuk membentuk perbezaan tekanan antara bahagian. Aliran kerja, termasuk bahan eksperimen, reagen, kertas rakaman, pen, bahan pembersih, dsb., hanya boleh mengalir dari zon pra-penguatan ke zon pasca-penguatan, iaitu dari zon penyediaan reagen → zon pemprosesan spesimen → zon penguatan → produk zon analisis, dan tidak boleh mengalir ke arah sebaliknya. Dilarang sama sekali untuk membalikkan aliran dalam koridor bersih sambil membentuk perbezaan tekanan kecerunan yang berbeza antara setiap bahagian, bilik penampan yang sepadan, dan koridor bersih supaya aliran udara adalah sama dengan arah kerja.

Menyediakan Kawalan

Dua kawalan negatif (kedua-duanya menggunakan air sebagai templat, satu dengan sampel terlibat dalam pengekstrakan asid nukleik dan satu lagi tidak terlibat dalam pengekstrakan, ditambah hanya semasa mengkonfigurasi sistem penguatan) disediakan setiap kali sebelum menjalankan eksperimen, untuk memantau pencemaran aerosol di makmal dan tentukan sama ada terdapat pencemaran dan apa yang menyebabkannya, supaya langkah-langkah boleh diambil untuk mencegah dan menghapuskannya. Kawalan positif juga harus ditetapkan untuk memantau kebolehpercayaan dan ketepatan keputusan eksperimen.

Memantau Aerosol Makmal

Udara makmal sentiasa disucikan menggunakan pembersih udara rumah, dan penapis dalam penulen dicelup ke dalam air, dicampur, dan air campuran digunakan sebagai sampel untuk ujian yang sepadan untuk mengikuti perkembangan pencemaran aerosol di udara. Kumpul secara kerap sampel swab kapas dari bahagian dalam dan permukaan pistol pipet, pengekstrak, penguat dan instrumen lain untuk ujian bagi memahami pencemaran dalam instrumen eksperimen.

Aliran kerja yang ketat

Setiap bahagian PCR dilengkapi dengan pakaian kerjanya sendiri, yang boleh dibezakan mengikut warna, dan pakaian kerja yang sepadan mesti ditukar apabila memasuki setiap bahagian; Sementara itu, pintu masuk koridor bersih dilengkapi dengan kasut khas untuk bilik PCR, yang mesti ditukar apabila masuk, dan tikar felt dilengkapi di hadapan setiap bahagian. Kakitangan makmal di koridor bersih hanya boleh pergi dari arah kawasan penyediaan reagen ke arah kawasan analisis hasil, dan setiap bahagian dilengkapi dengan kakitangan yang berbeza untuk operasi jika keadaan membenarkan, untuk mengelakkan kakitangan setiap bahagian daripada bergerak di sekeliling satu sama lain.

Tingkatkan Pembersihan dan Pembasmian Kuman

Pembersihan dan pembasmian kuman makmal yang baik adalah cara yang berkesan untuk mencegah pencemaran aerosol di dalam makmal. Skop pembersihan makmal termasuk pembersihan permukaan kerja (bangku ujian, bangku ultra-bersih dan kabinet penyimpanan, dsb.), permukaan instrumen dan peralatan (kepala emparan berputar, blok pemanas untuk pengekstrakan DNA, slot sampel penguat, pipet rod untuk paip, slot spiking penganalisis genetik, dsb.), alat atau perkakas yang digunakan semula, dsb.

Sebelum dan selepas permulaan eksperimen, permukaan kawasan dan instrumen yang disebutkan di atas disapu berulang kali dengan larutan natrium hipoklorit 10% yang baru disediakan, dan kemudian digosok dengan 75% etanol untuk membuang sisa, dan eksperimen hanya boleh dilakukan selepas alkohol telah menguap. Ini boleh membuang pelbagai bahan pencemar yang melekat pada permukaannya dengan berkesan. Pada masa yang sama, makmal sentiasa dibasmi kuman dengan penyinaran cahaya UV.