Medium Budaya DMEM serbuk

DMEM dibangunkan berdasarkan medium MEM. Berbanding dengan medium MEM, kandungan asid amino telah meningkat sebanyak 2 kali ganda, dan kandungan vitamin telah meningkat sebanyak 4 kali ganda. Pada masa yang sama, asid amino bukan penting, ion besi surih dan natrium piruvat telah ditambah. Medium DMEM pada mulanya direka bentuk dengan kandungan glukosa 1000mg/L (jenis rendah gula), dan kemudiannya membangunkan kandungan glukosa 4500mg/L (jenis gula tinggi), yang telah digunakan secara meluas dalam penanaman pelbagai sel. Medium kultur glukosa tinggi digunakan secara meluas dalam sel yang berkembang pesat dengan lekatan yang rendah, sel mieloma hibridoma, sel klon, sel yang ditransfeksi DNA, sel perumah pelbagai virus primer, kultur sel tunggal, dan pengeluaran vaksin, seperti ekspresi sel CHO Pengeluaran vaksin EPO dan hepatitis B. Medium rendah glukosa lebih sesuai untuk budaya metabolisme yang lebih perlahan, sel pematuhan bergantung. Medium bebas glukosa boleh melaraskan kepekatan glukosa sesuka hati mengikut keperluan penyelidikan, yang mudah dan cepat.DMEM tidak mengandungi protein, lipid atau faktor pertumbuhan. Oleh itu, DMEM perlu ditambah dengan nutrien, biasanya dengan 10% serum lembu janin (FBS). DMEM menggunakan sistem penimbal natrium bikarbonat (3.7 g/L) dan oleh itu memerlukan persekitaran CO5 10-2% untuk mengekalkan pH fisiologi. Untuk pelbagai aplikasi kultur sel, kami menawarkan media DMEM yang diubah suai dengan pelbagai komponen, serta media DMEM dengan komponen yang boleh disesuaikan.

Ramuan Medium Kultur DMEM Serbuk

Medium kultur sel serbuk kering DMEM ini perlu ditambah dengan natrium bikarbonat, pH diselaraskan dan ditapis semasa penyediaan. Rumusan terperinci adalah seperti berikut:

1. Tambah 950 mL air suling ke dalam bekas pembancuh sehampir mungkin dengan isipadu akhir.
2. Masukkan medium serbuk kering pada suhu bilik (15°C hingga 30°C) air dan kacau perlahan-lahan. Jangan panaskan air.
3. Bilas bahagian dalam pek untuk mengeluarkan sisa serbuk.
4. Tambahkan 50mL larutan NaHCO75 3g/L ke dalam medium kultur.
5. Laraskan pH kepada 0.2 hingga 0.3 unit di bawah pH kerja akhir yang dikehendaki dengan menambah dan mengacau 1 N NaOH atau 1 N HCl secara perlahan-lahan. pH mungkin meningkat sebanyak 0.1 hingga 0.3 unit selepas penapisan. pH kerja yang disyorkan ialah 7.0-7.4.
6. Gunakan air suling untuk melaraskan isipadu akhir.
7. Segera proses medium kultur melalui membran penapis 0.2 µm ke dalam bekas steril menggunakan sistem penapisan tekanan positif.