Campuran Nutrien F-12 Ham Serbuk

Campuran Nutrien F-12 Ham mengandungi rangkaian komponen yang lebih luas daripada media basal lain, termasuk zink, putrescine, hypoxanthine dan timidin. Ia sering digunakan sebagai medium basal untuk kultur bebas serum dan amat sesuai untuk kultur sel tunggal dan pengklonan di bawah keadaan serum yang rendah. Ia juga digunakan secara meluas untuk kultur sel kanser dan sel primer seperti sel hati tikus, sel epitelium prostat tikus, kondrosit, sel otot tikus, sel embrio ayam dan banyak lagi. Ham's F-12 tidak mengandungi protein, lipid atau faktor pertumbuhan. Oleh itu, ia mungkin perlu ditambah dengan nutrien dan biasanya memerlukan penambahan 10% serum lembu janin (FBS). F-12 Ham menggunakan sistem penimbal bikarbonat dan oleh itu memerlukan persekitaran CO5 10-2% untuk mengekalkan nilai pH fisiologi.
Kami menawarkan pelbagai formulasi media F-12 Ham yang diubah suai dengan komponen berbeza untuk pelbagai aplikasi kultur sel.

Bahan-bahan Campuran Nutrien F-12 Ham Serbuk

Medium kultur sel serbuk kering F-12 Ham ini perlu ditambah dengan natrium bikarbonat, pH diselaraskan dan ditapis semasa penyediaan. Pelan penyediaan terperinci adalah seperti berikut:

1. Tambah 950 mL air suling ke dalam bekas adunan sedekat mungkin dengan isipadu akhir.
2. Masukkan medium kultur kering pada suhu bilik (15°C hingga 30°C) air dan kacau perlahan-lahan. Jangan panaskan air.
3. Bilas bahagian dalam bungkusan untuk mengeluarkan semua sisa serbuk.
4. Tambahkan 15.7mL larutan 75g/L NaHCO3 ke dalam medium.
5. Laraskan nilai pH kepada pH kerja akhir yang dikehendaki di bawah 0.2 hingga 0.3 unit dengan menambah dan mengacau 1 N NaOH atau 1 N HCl secara perlahan-lahan. Nilai pH mungkin meningkat sebanyak 0.1 hingga 0.3 unit selepas penapisan. Nilai pH kerja yang disyorkan ialah 7.5-7.9.
6. Laraskan isipadu akhir dengan air suling.
7. Gunakan segera sistem penapisan tekanan positif untuk menapis medium melalui membran penapis 0.2 μm ke dalam bekas steril.